白(bai)蛋白(bai)融合蛋白(bai)

白蛋白融(rong)合(he)蛋白（rHSA Fusion Proteins）是將目的蛋白與(yu)白蛋白進行融(rong)合(he)表達的蛋白質，可延長(chang)目的蛋(dan)白在體內的半衰期，在生物醫(yi)藥(yao)領域中具有(you)廣泛(fan)的應用價值。早在1992年，歐洲科(ke)學家(jia)就嘗(chang)試將白(bai)蛋白(bai)和CD4蛋白(bai)基因融合(he)后在酵母(mu)體(ti)系中表達，用(yong)于HIV的(de)治療。2014年(nian)，GSK公司推出一(yi)種(zhong)GLP-1受(shou)體激動(dong)劑阿必魯肽（Albiglutide），用于治療2型(xing)糖尿病(bing)，該藥物(wu)是將兩個GLP-1串聯后與(yu)rHSA融合(he)，具(ju)有長效性，僅需每1-2周注射一(yi)次，可有效幫助患者管理(li)其血糖水(shui)平。2016年，CSL Bering公司Idelvion經FDA批(pi)準上市，該產品是凝(ning)血因子(zi)IX和rHSA的融合(he)蛋白，在血液(ye)中半衰期(qi)更(geng)長，用于治療B型血友病。此外，還有很(hen)多其(qi)他類型的白蛋(dan)(dan)白融(rong)合(he)(he)蛋(dan)(dan)白正處于臨床(chuang)試(shi)驗(yan)階段，例如，生(sheng)長因子-rHSA融(rong)合(he)(he)蛋(dan)(dan)白、白介素2-rHSA融(rong)合(he)(he)蛋(dan)(dan)白、抗體(ti)片段-rHSA融合(he)蛋(dan)白（如scFv-rHSA融合蛋白(bai)）、干(gan)擾素α-2b-rHSA融(rong)合蛋白等。

AlbuPure®層析填料

AlbuPure®是Astrea Bioseparations和Albumedix公司合作開(kai)發(fa)的(de)白蛋白親和層析填料，填料基架(jia)是(shi)粒徑均一的高交聯瓊脂糖，配基是合成的三嗪化合物(wu)，具體(ti)高(gao)流(liu)速、高(gao)動(dong)態結合載(zai)量、強化學耐受性等特點(dian)，主要用于白蛋(dan)白融合蛋(dan)白的純化。AlbuPure®的性能參數(shu)如下(xia)表所示(shi)。

AlbuPure®具有(you)卓越(yue)的白蛋白融合蛋白結合性能，如圖4所示，研究人員在(zai)不同(tong)pH值不同(tong)流速的上(shang)樣條件下，探究了AlbuPure®對scFv-rHSA的動態結(jie)合載量，結(jie)果(guo)表明(ming)，在pH=4.5，240cm/h線(xian)性流(liu)速下，AlbuPure®對目標融合蛋白(bai)的動態結合載量(liang)最(zui)佳(jia)，10%流穿時，載量高達38.4mg/mL。

圖4. AlbuPure®動態結合(he)載量研究

與Mimetic Blue® SA HL P6XL類似(si)，AlbuPure®親和層析填(tian)料(liao)也具有優秀的化學穩定性，可(ke)耐受1M NaOH溶(rong)液的清(qing)潔，對常見(jian)的變(bian)性(xing)(xing)劑(ji)、表面活性(xing)(xing)劑(ji)、還(huan)原劑(ji)等兼容(rong)性(xing)(xing)良好。

在一項研究測試中，研究人員使用酵母體系表達Anti-HIV gp41-rHSA融合(he)蛋白（72kDa），收獲液經(jing)澄清后，上樣(yang)到裝有AlbuPure®的層(ceng)析柱中，層析工藝(yi)參數如下表(biao)所示：

由(you)圖5的層(ceng)析圖譜和圖6的SDS-PAGE檢(jian)測結果可知，AlbuPure®可(ke)以高效捕獲(huo)Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白(bai)，雜質蛋白(bai)在上樣時流穿，經過三次不(bu)同pH值下(xia)(xia)的淋(lin)洗(xi)步驟(zou)，可進一步去除(chu)少量掛柱(zhu)的雜質蛋白(bai)，目(mu)標融合蛋白(bai)最后(hou)由辛酸鈉洗(xi)脫下(xia)(xia)柱(zhu)，純(chun)度極高。

圖5. AlbuPure®純(chun)化Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白的(de)層析(xi)圖譜(pu)

圖(tu)6. SDS-PAGE檢測結果

Lane: 1. Load (diluted); Lane 2: FT (neat); Lane 3: post load wash (neat); Lane 4: wash 1 (neat); Lane 5: wash 2 (neat); Lane 6: wash 3 (neat); Lane 7: elution (diluted); Lane 8: elution (10 fold dilution of lane 7); Lane 9: human albumin standard (1μg)

AlbuPure®訂(ding)購信息

散裝填料

預裝柱

如您(nin)對上述產品感興趣，歡迎點擊(ji)填寫信息，Astrea Bioseparations技術專(zhuan)家(jia)將為您提供個性(xing)化優化方案，切(qie)實幫您解決純化工(gong)藝(yi)中的疑難(nan)問(wen)題。

Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學，擁有(you)超過30年層析介質(zhi)研發和(he)生產(chan)經驗，是世(shi)界級層析介質(zhi)產(chan)品與服務供應(ying)商。目前使用Astrea的產品已有超過21個(ge)生產工藝通過了(le)FDA和EMA的(de)批準。Astrea Bioseparations在全球擁有3個研(yan)發(fa)和(he)(he)生產基(ji)地，專注為生物(wu)大(da)分(fen)子(zi)和(he)(he)CGT領(ling)域提(ti)供行(xing)業領(ling)先的層析介質(zhi)和技術服務(wu)。Astrea Bioseparations推出(chu)的(de)基于納米(mi)纖維的(de)新(xin)型(xing)層(ceng)析技術，解決了傳統生物分離工具載量低(di)和工藝耗時問題(ti)，實現更(geng)快(kuai)、更(geng)環保、更(geng)具成本效益(yi)的(de)純化(hua)過程(cheng)，完全符合當(dang)今生物治療創新(xin)的(de)需求。

西美杰是Astrea Bioseparations中國區代(dai)理，為用戶提供完善的(de)技術支持(chi)與售(shou)后服(fu)務。歡迎(ying)隨(sui)時撥打西美杰(jie)客服熱線(xian)400-050-4006或登錄網站www.jnjxcf.cn了解更(geng)多信息。

參考(kao)文獻

1. 人血清(qing)白蛋白融合技術在(zai)藥(yao)物長效化改造中的應用，生(sheng)命科學，第(di)27卷，第(di)9期，2015年9月(yue)

2. R. Raoufinia et al., Overview of Albumin and Its Purification Methods, 2016

3. M. Sanches et al., AlbuCORE: an albumin-based molecular scaffold for multivalent biologics design, 2020

4. Technical User Guide:  Mimetic Blue® SA HL P6XL, Astrea Bioseparations

5. Application Note: Capture and purification of human serum albumin from human source plasma using Mimetic Blue® SA HL P6XL, Astrea Bioseparations

6. Technical User Guide: AlbuPure®, Astrea Bioseparations

7. Technical Note: Capture and purification of recombinant albumin-fusion proteins using AlbuPure®, Astrea Bioseparations